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新產(chǎn)品發(fā)布 - STEMdiff 胃類(lèi)器官試劑盒

時(shí)間:2021-09-30   瀏覽次數:1505次


原創(chuàng ):STEMCELL


很高興宣布推出從 hPSC 生成胃類(lèi)器官的 STEMdiff? 胃類(lèi)器官試劑盒。該培養系統由STEMdiff? 胃類(lèi)器官分化試劑盒和STEMdiff? 胃類(lèi)器官擴增試劑盒組成。其中STEMdiff? 胃類(lèi)器官分化試劑盒用于將 hPSC 分化為胃類(lèi)器官,STEMdiff? 胃類(lèi)器官擴增試劑盒用于維持和擴增 hPSC 衍生的胃類(lèi)器官。

 

產(chǎn)品描述

hPSC 衍生的胃類(lèi)器官可用于研究胃發(fā)育、炎癥、再生、微生物相互作用或疾病建模。 使用 STEMdiff? 胃類(lèi)器官分化試劑盒,可以高效且可重復地從hPSC 誘導和擴增胃類(lèi)器官,以形成與發(fā)育中的胃具有生理相關(guān)性的便捷模型系統。

該試劑盒操作簡(jiǎn)單,包含四階段操作步驟,參考了 McCracken et al. (Nature 2014)  Bartfeld et al. (Gastroenterology 2015發(fā)表的文獻,能夠直接從 hPSC 誘導并分化為胃類(lèi)器官,并支持胃類(lèi)器官的長(cháng)期擴增和冷凍保存。用該試劑盒培養的胃類(lèi)器官具有與發(fā)育中的胃上皮和相關(guān)間充質(zhì)一致的細胞組成,為胃研究以及藥物研發(fā)和化合物篩選提供了生理相關(guān)的模型系統。 該試劑盒優(yōu)化用于mTeSR?1(#85850)或 mTeSR? Plus(#100-0276)中培養的hPSC細胞。

 

 STEMdiff? 胃類(lèi)器官分化試劑盒


STEMdiff? 胃類(lèi)器官分化試劑盒

貨號 #100-0475

1 Kit

STEMdiff? Definitive Endoderm Basal Medium

05111

100 mL

STEMdiff? Definitive Endoderm Supplement CJ (100x)

05113

1.1 mL

STEMdiff? Gastrointestinal Supplement PK

05141

0.64 mL

STEMdiff? Posterior Foregut Supplement

100-0477

0.64 mL

STEMdiff? Gastric Organoid Medium

100-0478

100 mL

STEMdiff? Gastric Organoid Expansion Supplement

100-0479

1.1 mL

 

STEMdiff? 胃類(lèi)器官擴增試劑盒

 

STEMdiff? 胃類(lèi)器官擴增試劑盒

貨號 #100-0490

1 Kit

STEMdiff? Gastric Organoid Medium

100-0478

100 mL

STEMdiff? Gastric Organoid Expansion Supplement

100-0479

1.1 mL

STEMdiff? 胃類(lèi)器官分化試劑盒的示意圖和分化過(guò)程中形態(tài)變化。

 hPSCs 以低密度(4,000 個(gè)細胞團塊/孔)的形式接種在康寧® Matrigel® 包被的 24 孔板上的 mTeSR?1 中,過(guò)夜培養。每天更換 mTeSR?1 培養基維持 2-D 單層培養物,直到細胞聚合度達到接近85 - 90%。

(A) 在第 0 天,使用 STEMdiff? Definitive Endoderm (DE) Medium(第 1 階段)替換 mTeSR?1 培養基開(kāi)始分化過(guò)程,每天更換培養基。 

(B) 在第 3 天,去除 STEMdiff? Definitive Endoderm (DE) Medium并替換為 STEMdiff? Gastric Posterior Foregut (PF) Medium(第 2 階段)。在第 5 天,將retinoic acid (RA,視黃酸)添加到 PF 培養基中。 

(C) 在分化的第 7 天,從上清液中收集漂浮的后前腸球體并嵌入 Corning® Matrigel®。在第 7 天和第 10 天之間,在 STEMdiff? Gastric Organoid Medium + RA 中培養嵌入的 PF 球體(第 3 階段)。在第 10 天和第 26 天之間,球體在 STEMdiff? Gastric Organoid Medium中成熟為被間充質(zhì)包圍的胃類(lèi)器官。

(D) 在第 20 - 26 天,在 STEMdiff? Gastric Organoid Medium中傳代的胃類(lèi)器官已進(jìn)行完全分化,直到觀(guān)察到胃標志物的表達(~第 34 天)。

(E)根據需求,可使用 STEMdiff? Gastric Organoid Expansion Medium 擴增胃類(lèi)器官用于下游應用或用CS10冷凍保存以備將來(lái)實(shí)驗。


四階段操作流程


應用方向

1.基礎研究

2.胃的發(fā)育和功能

3.一般胃特異性細胞生物學(xué)

4.疾病建模

5.幽門(mén)螺桿菌感染

6.消化性潰瘍病

7.胃炎

8.幽門(mén)狹窄

9.轉化醫學(xué)

10.精準醫療

11.胃毒性藥物篩選



產(chǎn)品優(yōu)勢

? 成分:無(wú)血清培養基可最大程度地減少變異性。

操作簡(jiǎn)便:將 hPSC 分化為胃類(lèi)器官只需簡(jiǎn)單的四階段操作步驟。

生理相關(guān)性:產(chǎn)生模擬正在發(fā)育的胃和相關(guān)間充質(zhì)的人胃類(lèi)器官。

速度快:分化后的胃類(lèi)器官可實(shí)現快速擴增及凍存。

 


相關(guān)產(chǎn)品推薦

胃類(lèi)器官培養過(guò)程所需試劑和耗材: 

產(chǎn)品名稱(chēng)

貨號

mTeSR?1 OR mTeSR? Plus

85850 OR 100-0276

Corning® Matrigel® hESC-Qualified Matrix

Corning 354277

Corning® Matrigel® Growth Factor Reduced (GFR) Basement membrane Matrix, Phenol Red-Free (≥ 8 mg/mL protein)

Corning 356231

Gentle Cell Dissociation Reagent

07174

24-well tissue culture-treated flat-bottom plate

38017 or 38021

Anti-Adherence Rinsing Solution

07010

Retinoic acid(視黃酸,培養的第2-3階段需要額外添加)

72262

DMEM/F-12 with 15 mM HPEPES

36254

Microcentrifuge tubes, 1.7 mL

38089

Cell scraper/lifter

38065 or 38067

D-PBS (Without Ca++ and Mg++)

37550

Conical tubes, 15 mL and 50 mL

38009 and 38010

CryoStor® CS10(用于胃類(lèi)器官凍存)

07930

 


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